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本文從六個方面闡述了分光光度計檢定結(jié)果的影響因素，包括標(biāo)準(zhǔn)器的選擇、波長示值誤差和重 復(fù)性項目波長檢定點的選擇、儀器的光譜帶寬、透射比示值誤差和重復(fù)性項目波長檢定點的選擇、標(biāo)準(zhǔn)石英吸 收池的配套性、濾光片的狀態(tài)。檢定員只有重視這六個方面的檢定細(xì)節(jié)，才能保證檢定結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。

分光光度計在各行各業(yè)都有著廣泛的應(yīng)用，是眾 多產(chǎn)品質(zhì)量檢測的重要計量器具，其量值的準(zhǔn)確可靠 對檢測結(jié)果影響深遠。分光光度計的檢定依據(jù)的是 JJG178-2007《紫外、可見、近紅外分光光度計》，主要 檢定項目有波長示值誤差與重復(fù)性、透射比示值誤差
與重復(fù)性、光譜帶寬、吸收池配套性等。使用到的標(biāo) 準(zhǔn)器主要有波長標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、透射比標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、標(biāo)準(zhǔn)石 英吸收池等。本文結(jié)合實際工作經(jīng)驗，總結(jié)出影響分 光光度計檢定結(jié)果的主要因素，期望對檢定人員的工 作有所幫助。

分光光度計檢定結(jié)果的影響因素主要包括六個 方面，分別是標(biāo)準(zhǔn)器的選擇、波長示值誤差和重復(fù)性 項目波長檢定點的選擇、儀器的光譜帶寬、透射比示 值誤差和重復(fù)性項目波長檢定點的選擇、標(biāo)準(zhǔn)石英吸 收池的配套性、濾光片的狀態(tài)。

1 標(biāo)準(zhǔn)器的選擇 JJG178-2007中列舉了用到的9種波長標(biāo)準(zhǔn)物 質(zhì)的波長示值誤差及重復(fù)性項目，并對它們適用的波 段進行了規(guī)定。這里特別要注意“標(biāo)準(zhǔn)干涉濾光片”。 它不適用于檢定Ⅰ級和Ⅱ級分光光度計。這主要是 因為干涉濾光片的波長定值不確定度比較大，一般在 0.4~0.9nm，已經(jīng)接近或超過Ⅰ級和Ⅱ級的技術(shù)指標(biāo)。 即便如此，檢定中也要注意干涉濾光片證書中提供的 定值不確定度是否足夠滿足Ⅲ級分光光度計的檢定 要求。

2 波長示值誤差和重復(fù)性項目波長檢定 點的選擇 JJG178-2007規(guī)定，檢定分光光度計A、 B段波長 示值誤差和重復(fù)性，每間隔100nm至少選擇一個波長 檢定點。各計量檢定機構(gòu)一般選擇使用氧化鈥濾光 片和鐠釹濾光片作為標(biāo)準(zhǔn)器。因其易于保存，使用方 便，而且吸收峰的數(shù)量多。但是并非所有的吸收峰都 適用于各級分光光度計的檢定。氧化鈥濾光片和鐠 釹濾光片是按JJG1034-2008《光譜光度計標(biāo)準(zhǔn)濾光 器》進行檢定的，此規(guī)程根據(jù)吸收峰的峰高、尖銳程 度、對稱性、年變化量的不同定義了一級峰和二級峰。 峰高越高、越尖銳、對稱性越好、年變化量越小，其定 值不確定度就越小。對于達不到一級峰和二級峰標(biāo) 準(zhǔn)的吸收峰，一般計量部門都會將其作為“參考峰”列 出。但應(yīng)該注意的是，因“參考峰”的峰形差、年變化 量大，應(yīng)盡量避免選擇其作為波長檢定點。

3 儀器光譜帶寬的影響
儀器的光譜帶寬，指的是從單色器射出的單色光 譜線強度輪廓曲線的二分之一高度處的譜帶寬度。 用來表征儀器的光譜分辨率。對于同一臺儀器，光譜 帶寬越大，測量光束能量越強，儀器數(shù)值越穩(wěn)定，反 之，儀器數(shù)值越不穩(wěn)定。高等級的分光光度計通常可 以自由設(shè)置不同的光譜帶寬。但是一些低等級的儀 器往往只能固定某個光譜帶寬。而且為了降低成本 的同時追求數(shù)值的穩(wěn)定，往往選用更大的光譜帶寬。 檢定分光光度計時，儀器的光譜帶寬應(yīng)與所使用 標(biāo)準(zhǔn)器定值時的光譜帶寬保持一致，否則將對波長示 值誤差的檢定結(jié)果造成影響，對于固定帶寬的分光光 度計更要特別注意這點。但是目前氧化鈥濾光片和 鐠釹濾光片的檢定部門通常只提供2nm帶寬下的檢 定結(jié)果。并不適用于市面上的固定5nm帶寬（或其它 更大帶寬）儀器的檢定。此時，應(yīng)向濾光片的檢定部 門要求提供不同帶寬下的濾光片檢定結(jié)果。對于不 同帶寬下濾光片的峰值波長檢定結(jié)果的差異的比較 見表1。 從表1中可以看出， 2nm帶寬與5nm帶寬下的峰 值波長大相差2.54nm，已經(jīng)超過了Ⅱ級分光光度 計的波長允差1.0nm。如果不使用儀器對應(yīng)帶寬下 的標(biāo)準(zhǔn)峰值波長數(shù)據(jù)，將對檢定結(jié)果造成嚴(yán)重影響， 甚至影響儀器級別判定。

4 透射比示值誤差和重復(fù)性項目波長檢 定點的選擇 JJG178-2007規(guī)定，分光光度計透射比示值誤差 和重復(fù)性的檢定，在紫外區(qū)可以使用紫外透射比標(biāo)準(zhǔn) 溶液在235nm、257nm、313nm、350nm處檢定，或使用 紫外區(qū)透射比濾光片檢定；在可見區(qū)可以使用光譜中 性濾光片在440nm、546nm、635nm處檢定。 但是JJG1034-2008對紫外透射比濾光片和光譜中性濾光片的檢定卻規(guī)定了254nm、300nm、340nm、 365nm、436nm、465nm、546nm、590nm、635nm這幾個 檢定點。雖然JJG1034-2008中也指出可以按“客戶 特殊要求的測量波長”，但是實際中發(fā)現(xiàn)有些濾光片 的檢定部門只按JJG1034-2008的波長點檢定，而沒 有按JJG178-2007的波長點檢定，造成濾光片的檢定 與使用相脫節(jié)。這種現(xiàn)象應(yīng)當(dāng)引起檢定規(guī)程編制者 的注意。況下，還是應(yīng)當(dāng)要求濾光片的檢定部 門按使用波長點進行檢定，并提供不同光譜帶寬下的 檢定結(jié)果。

5 標(biāo)準(zhǔn)石英吸收池配套性的影響 JJG178-2007規(guī)定，可以用紫外標(biāo)準(zhǔn)溶液檢定分 光光度計紫外區(qū)透射比示值誤差和重復(fù)性，這就需要 使用到標(biāo)準(zhǔn)石英吸收池。JJG178-2007還規(guī)定了配 套的標(biāo)準(zhǔn)石英吸收池透射比配套誤差不大于0.2%。 但是在日常檢定工作中，由于需要經(jīng)常清洗擦 拭，標(biāo)準(zhǔn)吸收池的透射比配套性往往不能一直保持不 大于0.2%的良好狀態(tài)。這就要求經(jīng)常檢定標(biāo)準(zhǔn)石英 吸收池的配套性是否符合要求，以免對測量結(jié)果造成 影響。
6 濾光片狀態(tài)的影響
在日常大量的分光光度計檢定工作中，難免會在濾光片表面留下灰塵和指紋，如果不注意及時清潔， 將對檢定結(jié)果造成不可預(yù)計的影響，尤其對透射比示 值誤差的影響大。濾光片表面的污垢將直接造成 其實際透過率降低，造成檢定結(jié)果不準(zhǔn)確。 輕微的灰塵往往難以查覺，一個簡單有效的辦法 是用一個強光源（手機LED補光燈）沿表面平行方向 低角度照射濾光片，細(xì)微的灰塵會將光線散射而被觀 察到，然后使用絨布和氣吹清潔濾光片表面，使之保 持清潔。
7 結(jié)語
影響分光光度計檢定結(jié)果的因素還有很多，本文 所列是容易被檢定員忽視的因素。只有更加注意檢 定過程中的影響因素和細(xì)節(jié)，才能提高分光光度計檢 定的水平，從而保證檢定結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。